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Elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn)
1.特異性強(qiáng):不與其它細(xì)胞反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高:實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
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ELISA試劑盒的測試要求
做好對照
正式試驗(yàn)時(shí),沙丁胺醇ELISA試劑盒報(bào)價(jià),應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,安徽沙丁胺醇ELISA試劑盒,如聚乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被(或抗原)的選擇:將(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),沙丁胺醇ELISA試劑盒價(jià)格,要求純度要好,沙丁胺醇ELISA試劑盒公司,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3)酶標(biāo)記工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
ELISA試劑盒的制備方法
包括以下步驟:
1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選;
2)抗原的制備;
3)采集;
4)間接ELISA方法的建立;
5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證;
6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證;
7)對屠宰場進(jìn)行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出戊型病毒,適用于大批量發(fā)病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預(yù)防、控制豬戊病毒的流行和阻斷戊病毒由豬向人傳播。
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