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熒光光譜定量分析
在低濃度時,溶液的熒光強度與熒光物質(zhì)的濃度成正比:F=Kc。其中,F(xiàn)為熒光強度,c為熒光物質(zhì)濃度,K為比例系數(shù)。這就是熒光光譜定量分析的依據(jù)。
上述關(guān)系不適用于熒光物質(zhì)濃度過高時,熒光物質(zhì)濃度過高,其熒光強度反而降低。原因有:
(1)內(nèi)濾效應(yīng)。一是,當(dāng)溶液濃度過高時,溶液中雜質(zhì)對入射光的吸收作用增大,相當(dāng)于降低了激發(fā)光的強度。二是,濃度過高時,入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強烈吸收,處于液池中、后部的熒光物質(zhì),則因受到入射光大大減弱而使熒光強度大大降低;而儀器的探測窗口通常對準(zhǔn)液池中部,從而導(dǎo)致檢測到的熒光強度大大降低。
(2)相互作用。較高濃度溶液中,可發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用,產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子的二聚物或其他溶質(zhì)分子的復(fù)合物,愛丁堡熒光光度計價格,從而導(dǎo)致熒光光譜的改變和/或熒光強度下降。當(dāng)濃度更大時,愛丁堡熒光光度計公司,甚至?xí)纬蔁晒馕镔|(zhì)的基態(tài)分子聚集體,導(dǎo)致熒光強度更嚴(yán)重下降。
(3)自淬滅。熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊,便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象,導(dǎo)致熒光強度下降。溶液濃度增大時會促使再吸收現(xiàn)象加劇。
當(dāng)然,熒光強度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等,在定量分析中需要加以考慮。
熒光光譜定量分析的計算與其他光譜類似,包括標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比例法等。
熒光光譜體系間跨越
是處于激發(fā)態(tài)分子的電子發(fā)生自旋反轉(zhuǎn)而使分子的多重性發(fā)生變化的過程。分子由激發(fā)單重態(tài)跨越到激發(fā)三重態(tài)后,愛丁堡熒光光度計報價,熒光強度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時,體系間跨越為常見,原因是在髙原子序數(shù)的原子中,電子的自旋與軌道運動之間的相互作用較大,有利于電子自旋反轉(zhuǎn)的發(fā)生。另外,在溶液中存在氧分子等順磁性物質(zhì)也容易發(fā)生體系間跨越,從而使熒光減弱。
熒光分析
熒光分析就是基于物質(zhì)的光致發(fā)光現(xiàn)象而產(chǎn)生的熒光的特性及其強度進行物質(zhì)的定性和定量的分析方法。目前,河北愛丁堡熒光光度計,也廣泛地作為一種表征技術(shù)來研究體系的物理、化學(xué)性質(zhì)及其變化情況,例如生物大分子構(gòu)象及性質(zhì)的研究。
熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據(jù)樣品分別選配石英池(液體樣品)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)。
熒光光譜分析可與顯微鏡耦合,獲得微區(qū)分析結(jié)果。熒光是無損傷、非接觸的分析技術(shù),還可用于自動檢驗、批量篩分、遠程原位分析和分析。
熒光分析的優(yōu)點:(1)靈敏度高;(2)選擇性強;(3)試樣量少、方法簡單;(4)提供較多的物理參數(shù)。但是也存在應(yīng)用范圍不夠廣泛、對環(huán)境敏感(干擾因素多)等缺點。
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