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等溫核酸試劑盒分類

目前新的等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴(kuò)增產(chǎn)品，能夠在15分鐘內(nèi)進(jìn)行常溫下的單分子核酸檢測(cè)。該技術(shù)對(duì)硬件設(shè)備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。常規(guī)PCR必須經(jīng)過(guò)變性、退火、延伸三個(gè)步驟，等溫核酸試劑盒，而PCR儀本質(zhì)上就是一個(gè)控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無(wú)需變性，在常溫下即可進(jìn)行。這無(wú)疑能大大加快PCR的速度。

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“一般來(lái)說(shuō)，核酸檢測(cè)是目前準(zhǔn)確的診斷方法。”有人告訴記者，核酸檢測(cè)試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒(méi)有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個(gè)方面有關(guān)。一是樣品沒(méi)有采集到。這一點(diǎn)很容易理解。例如，咽拭子采樣時(shí)人比較難受，深度不夠可能會(huì)采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。

另一個(gè)假陰性的原因是核酸檢測(cè)試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動(dòng)，特別是定量的不造成檢測(cè)的不準(zhǔn)確。換句話說(shuō)，由于這一次各家核酸檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商都是臨時(shí)啟動(dòng)，等溫核酸試劑盒代理，有些準(zhǔn)備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導(dǎo)致在生產(chǎn)過(guò)程中不進(jìn)行定位，或是酶活性不足，等溫核酸試劑盒總代理，或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等，等溫核酸試劑盒報(bào)價(jià)，都可能造成檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

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如何提高擴(kuò)增曲線的可重復(fù)性?

優(yōu)化擴(kuò)增曲線考慮以下因素: 對(duì)于低拷貝數(shù)模板，不穩(wěn)定擴(kuò)增可能是因?yàn)檫_(dá)到檢測(cè)限或者是反應(yīng)混勻程度不同（未混勻的反應(yīng)擴(kuò)增效率不佳）。另外，在低溫情況下存貯，重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀，也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴(kuò)增的原因。所以，20x反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體，不影響其功能，并且有效提高擴(kuò)增效率。不穩(wěn)定擴(kuò)增也可能是因?yàn)閙aster mix量不足，在加入體系前，用戶必須保證震蕩后20x反應(yīng)組分均一。

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