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哺乳動物細胞溶質(zhì)中的SOD呈綠色，并且由兩種亞單位構成，一種含有銅，另一種含有鋅（Cu/Zn-SOD）。線粒體和細菌SOD為紅紫色并含有錳（Mn-SOD）。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。為了測定SOD的活性，研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法，其中，NBT的間接法為常用，因為它很方便。但是，NBT法有幾個缺點，例如生成的染料水溶性差，單寧含量測試盒使用，而且會和氧化酶的還原型發(fā)生反應。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測，但它和超氧化物反應過于劇烈，不能測定低水平的SOD。




加酶標：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ ”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，單寧含量測試盒，則410nm）處，單寧含量測試盒怎么樣，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，單寧含量測試盒供應商，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。




使用研磨棒進行勻漿時:① 取1～100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊狀。② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。③ 加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中，充分振蕩混合后，65℃保溫5分鐘?！緩闹参锊牧匣蛑参锱囵B(yǎng)細胞中提取基因組DNA】① 按下表稱取適量的新鮮植物材料（如選用的是冷凍干燥植物材料，則用量減半），剪成小塊放入研缽中，加入液氮，待樣品冷凍完全后快速、用力研磨至粉末狀。




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