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低溫生物菌種——菌種分離方法介紹

孢子分離又可分為以下幾種方法：

( 1 ）褶上涂抹法：選取新鮮、健壯、未開傘、未裂破的子實(shí)體，洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘，然后連同培養(yǎng)基一起放入接種箱內(nèi)，經(jīng)熏蒸消毒12 ～ 24 小時(shí)，再按無菌操作技術(shù)將接種環(huán)在子實(shí)體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環(huán)在培養(yǎng)基上劃線接種，，后置于25 ～ 28 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，可得純菌種。

( 2 ）孢子印采集法：取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經(jīng)24 小時(shí)后，便落下孢子，形成印痕（即孢子印）。然后，用接種環(huán)或玻璃棒蘸取孢子，接種在平面或斜面培養(yǎng)基上，進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，可得純菌種。

( 3 ）孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃鐘罩、培養(yǎng)皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右，盤內(nèi)先墊襯4～6 層紗布，中央放1 副9 厘米直徑的培養(yǎng)皿，大蓋口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培養(yǎng)皿上放1 只鉛絲繞成的三角架，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個(gè)孢子收集器，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內(nèi)滅菌2小時(shí)。

孢子收集器滅菌消毒后，放入無菌室或無菌箱內(nèi)。然后，用小刀割取1 塊4～5 厘米大小的子實(shí)體，插在收集器內(nèi)的三角架頂上（若無孢子收集器，也可用培養(yǎng)皿代替）。再置于溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)24 小時(shí)，培養(yǎng)皿中便可見到白色粉狀物，此即為孢子。此時(shí)，可將孢子收集器再移至接種箱內(nèi)，取出培養(yǎng)皿，蓋好，并在培養(yǎng)皿內(nèi)加入10 ～ 20 毫升的無菌水，使孢子散于本中，成為孢子懸浮液。然后，再用無菌打針筒或吸管吸取孢子懸浮液，接種于試管斜面培養(yǎng)基上，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃溫度下培養(yǎng)5 ～ 7 天，培養(yǎng)基上便可長出白色菌落。待菌落直徑有0 . 5 厘米時(shí)，選健壯的菌落，再移接于另一試管的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。當(dāng)白色菌絲長滿試管時(shí)，便得純菌種。

低溫生物菌種——菌種分離方法

寄主分離法即從生長有某種真菌的寄主體上（如茯苓、木耳木段）取下木片，進(jìn)行分離的方法。如木耳制種時(shí)，可選朵大、出耳多、質(zhì)厚的耳棒（即長有木耳的木段）。采集后，削去耳根下的樹皮，將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片，在無菌條件下，切去無耳菌絲部分，留下有耳菌絲部分，浸入水中1 分鐘，取出再用無菌水沖去木片上的液體。然后，用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊，放入斜面培養(yǎng)基內(nèi)，置24 ～26 ℃下培養(yǎng)，及時(shí)淘汰雜菌，選取純菌絲進(jìn)行移植培養(yǎng)，即得菌種。

低溫生物產(chǎn)品特性

自古以來生物的產(chǎn)品具有高選擇性、高轉(zhuǎn)化率和高轉(zhuǎn)化速度的特性，可以在常溫、低壓或中壓的發(fā)酵條件下進(jìn)行生產(chǎn)。該產(chǎn)品還具有以下特點(diǎn)：

1、易工程化：采用通用性強(qiáng)的發(fā)酵工藝和設(shè)備，適應(yīng)規(guī)?；a(chǎn)；

2、高度靈活：代謝對(duì)H?/CO/CO?沒有比例要求；

3、條件溫和：常溫、低壓或中壓等溫和條件下操作；

4、耐受性高：抗雜菌、對(duì)硫化物等常規(guī)雜質(zhì)具有較強(qiáng)耐受性；

5、高經(jīng)濟(jì)性：生產(chǎn)項(xiàng)目建設(shè)投資低，1-2年可收回建設(shè)投資，投資回報(bào)率高；

6、綠色生產(chǎn)：利用H?、CO和CO?氣體，固定二氧化碳, 節(jié)能減排降污染，能耗低，低水耗，環(huán)境友好。

微生物菌種的作用

刺激作物生

有些微生物肥料中的微生物還可分泌植物類物質(zhì)、維生素等，刺激和調(diào)節(jié)作物生長發(fā)育。例如，固氮菌等能夠產(chǎn)生多種活性物質(zhì)(生長素、環(huán)己六醇、泛酸、吡哆醇、硫胺素等)，固氮菌培養(yǎng)物中可檢測(cè)到3-乙酸；熒光假單孢菌的所有菌株均能產(chǎn)生赤素和類赤素物質(zhì)，部分菌株還能產(chǎn)生乙酸，少數(shù)菌株能合成生物素和泛酸；叢枝菌根真菌能誘導(dǎo)牧草植株產(chǎn)生細(xì)胞分裂素(CTK)，改變脫落酸(ABA)與赤素的比例。