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分析試劑盒配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 溫育:操作同3。 洗滌:操作同5。 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
在全自動(dòng)生化分析儀使用中,我們發(fā)現(xiàn)一個(gè)項(xiàng)目會影響緊隨其后項(xiàng)目的測試結(jié)果,造成這種影響的原因之一是一種實(shí)際中含有另一試驗(yàn)的測定物質(zhì)而直接干擾其測試結(jié)果。比如:在TP試劑中含有大量的CUSO4,如果將Cu放在TP項(xiàng)目的后面檢測,會使檢測結(jié)果偏高或重復(fù)性差。再如P放在含有磷酸鹽的項(xiàng)目后面,TBA放在含有膽酸鹽的項(xiàng)目后面都會使檢測結(jié)果偏高或重復(fù)性差。
目前將不同批號的試劑混合在一起使用的想象在檢驗(yàn)中經(jīng)常發(fā)生,當(dāng)然這一方面是為了節(jié)省成本,另一方面為了方便。但是不管是什么品牌、是什么試劑,由于不同批號的試劑生產(chǎn)時(shí)間不同,試劑中工具酶的活性會有差異,會發(fā)生水解的底物濃度隨時(shí)間長短也會不同。因此混在一起使用而又不定標(biāo),可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。還有如果有的試劑開瓶時(shí)間太長,空氣中的灰塵或細(xì)菌會進(jìn)入瓶內(nèi),由于有的試劑含量有大量的蛋白質(zhì)和鹽,是細(xì)菌生產(chǎn)的好條件。
全自動(dòng)生化分析儀屬于光學(xué)分析儀器,本質(zhì)就相當(dāng)于一個(gè)分光光度計(jì),基于物質(zhì)對光的選擇性吸收,即分光光度法,基本測量原理還是依據(jù)比爾定律。單色器將光源發(fā)出的復(fù)色光分成單色光,特定波長的單色光通過盛有樣品溶液的比色池,光電轉(zhuǎn)換器將投射光轉(zhuǎn)換為電信號后送入信號處理系統(tǒng)進(jìn)行分析,計(jì)算機(jī)再根據(jù)用戶選擇的工作方式對測量數(shù)據(jù)進(jìn)行處理、運(yùn)算、分析、保存,打印機(jī)同時(shí)打印出相應(yīng)的結(jié)果。