濱州二醇基SPE柱規(guī)格多重優(yōu)惠「碩譜生物」

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反相模式下，溶劑體系的極性應(yīng)以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)物，所選擇的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應(yīng)能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。

正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動(dòng)相極性的分離模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團(tuán)極性相互作用；極性力比非極性力強(qiáng)，但比離子力弱；常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力，因?yàn)槿鯓O化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團(tuán)。結(jié)果表明： SPE正相萃取后，樣品基質(zhì)多為弱極性，如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)物多含有極性官能團(tuán)。

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渠道效應(yīng)

當(dāng) SPE小柱填料裝實(shí)后，流速過小柱時(shí)，液體是以層流通過填料層，將填料層充分浸潤(rùn)，潤(rùn)濕的液面截層向上推進(jìn)，見附圖；流速過大時(shí)，柱床厚度過大，可能在填料內(nèi)形成溝道，液流將穿過溝道，快速通過小柱，而使填料浸潤(rùn)不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減少，嚴(yán)重影響填料對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的保留性。

溶液環(huán)境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性，我們?yōu)槭裁匆P(guān)注該化合物的 pKa值，這些因素需要放在C18柱狀物上嗎？

A：首先， Ka指酸度系數(shù)，也稱為酸離解常數(shù)，可以被理解為酸離解H離子的能力，而 pKa=- lgKa，對(duì)于酸，在環(huán)境中 pH離子的平衡如下

排氣泡注意事項(xiàng)

排泡時(shí)，一般排除1/3柱體體積的溶劑即可排除填充物中的氣泡，切記不可將溶液排干。防脫水，手動(dòng)排氣泡速度不易過快，但也不能過慢，過慢的速度可能無法排出較大的氣泡。

要是激1活平衡液不小心排干了怎么辦？只需再加入活化溶劑，使之成為氣泡。

適當(dāng)?shù)嘏懦龤馀菘梢栽谝欢ǔ潭壬媳苊膺^慢或流速不穩(wěn)定的情況。那么我們的恢復(fù)，平衡性能不能得到保證？有一種神奇的小操作，就是在做完這兩個(gè)步驟后抽干，這樣我們就可以得到更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

固相萃取(Solid Phase Extraction，簡(jiǎn)稱 SPE)是20世紀(jì)70年代中期發(fā)展起來的樣品前處理技術(shù)，其用途廣泛，并日益受到人們的歡迎。按其不同的吸附填料和吸附機(jī)理，主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱。正相、反相固相萃取小柱主要用于萃取極性和非極性化合物，而對(duì)某些帶電物質(zhì)(離子化合物)的萃取回收率較低，例如C18固相萃取小柱，當(dāng)目標(biāo)化合物處于離子狀態(tài)時(shí)，C18對(duì)該化合物的能力因子顯著降低。

離子化固相萃取技術(shù)適合于分解為帶電離子的化合物，其作用機(jī)制是在帶電的目標(biāo)化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產(chǎn)生靜電吸引。試樣基質(zhì)可以是極性的，例如水溶液，也可以是非極性的有機(jī)溶液，但實(shí)際使用時(shí)用水溶液較多，如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。

在選擇C18反相分離柱時(shí)，應(yīng)根據(jù)樣品情況，改變流動(dòng)相的組成或溶劑強(qiáng)度，以提高分離度、選擇性或保留時(shí)間。

反相法C18在分離過程中，水可以與水-甲1醇、水-乙1腈、水-四氫呋1喃等多種有機(jī)溶1劑混合，而且分離效果也很好。適當(dāng)?shù)母牧紕缛?胺或乙1酸，可抑制硅膠表面殘余硅羥基的酸性，從而減少對(duì)酸或堿性組分的保留，并減少拖尾；同時(shí)，對(duì)流動(dòng)相 PH值的調(diào)節(jié)，可大大改變酸性或堿性組分的選擇性。對(duì)酸性組分，流動(dòng)相 PH<7時(shí)，增加色譜柱的保留時(shí)間；對(duì)堿性樣品，流動(dòng)相 PH≥7時(shí)，將堿性組分分為游離型(RNH2)，極性小，保留時(shí)間增大，可在固定相和流動(dòng)相之間多次分布，提高堿性組分的選擇性。

回收率

當(dāng)一個(gè)完整的 SPE操作過程中，目標(biāo)化合物可能會(huì)出現(xiàn)在出液、淋洗、洗脫液或吸附劑中，當(dāng)“目標(biāo)物不能回收或回收率低”現(xiàn)象出現(xiàn)時(shí)，則向樣品溶液中加入標(biāo)液，然后進(jìn)行一個(gè)完整的 SPE操作，分別收集出液、淋洗液和洗脫液并進(jìn)行分析。

先確定目標(biāo)化合物存在于哪個(gè)部分，然后確定問題來自以下哪個(gè)環(huán)節(jié)：目標(biāo)化合物不能保留在吸附劑中；沒有完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

目標(biāo)化合物在吸附劑中保留度不足

在樣品流出液或淋洗液中發(fā)現(xiàn)5%以上的目標(biāo)化合物時(shí)，可得出“不能保留目標(biāo)化合物在吸附劑中”的結(jié)論。

2.目標(biāo)化合物未完全洗脫

在樣本溶液流出液和淋洗液中沒有出現(xiàn)目標(biāo)化合物，而在洗脫液中只出現(xiàn)少量或不出現(xiàn)目標(biāo)化合物，則判斷為“目標(biāo)物未完全洗脫”

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當(dāng)選用柱狀規(guī)格時(shí)，必須考慮到目標(biāo)化合物和在萃取條件下可能吸附的總干擾物，而不僅僅是目標(biāo)化合物。另外，即使目標(biāo)化合物未超過柱容量， SPE柱在保留目標(biāo)化合物的同時(shí)也保留了部分干擾物，由于兩者的總量已超過柱容量，其結(jié)果必然是部分目標(biāo)化合物無法保留在 SPE柱中。

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預(yù)處理溶劑和參數(shù)的選?。?

確定預(yù)處理 SPE柱所用溶劑及其用量和流速，并進(jìn)行平衡。在反相或離子交換柱中，通常以或極性為預(yù)處理溶液，以水或緩沖溶液為平衡溶液。

樣本過柱流速度的選擇：下一步是確定樣品通過 SPE柱流動(dòng)速度。過柱流速與 SPE試樣中填充物的粒徑分布、填充物的填充密度、目標(biāo)化合物與試樣基質(zhì)的結(jié)合程度、試樣的粘度等因素有關(guān)。