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廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。此外，用real-timeQ-PCR來(lái)研究mRNA時(shí)，受到不同RNA樣本存在不同的逆轉(zhuǎn)錄（RT）效率的限制。

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豬流行性腹瀉病毒和非洲病毒都具有在豬源原料中存活的能力；然而，作用機(jī)制目前尚不清楚。根據(jù)應(yīng)對(duì)流行性腹瀉病毒的經(jīng)驗(yàn)，在不影響動(dòng)物性能和飼料成本的情況下，替換原料的可行性使得很多生產(chǎn)者不再使用豬源原料。研究表明熱工過(guò)程可以殺滅病毒（如流行性腹瀉病毒），但這只能作為緊急緩解措施，因?yàn)檫@要求產(chǎn)品在干燥和運(yùn)輸過(guò)程中必須不存在交叉污染。而熒光定量PCR可以在反應(yīng)進(jìn)行過(guò)程中進(jìn)行累積擴(kuò)增產(chǎn)物的分析和檢測(cè)，即“實(shí)時(shí)”。如果生產(chǎn)者認(rèn)可排除豬源原料是可行的，那么還應(yīng)該考慮到那些間接的豬源原料，像添加劑、基礎(chǔ)混合物和那些可能源于豬源的動(dòng)物蛋白或脂肪等。

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首先，養(yǎng)豬場(chǎng)（戶）真正了解所使用的飼料原料的供應(yīng)鏈非常重要。包括：從誰(shuí)那里購(gòu)買了原料？他們又從哪里買到？在運(yùn)輸中是否與其他原料混雜或混合？每個(gè)中轉(zhuǎn)地點(diǎn)的生物安全政策是什么？這些對(duì)于正確評(píng)估原料攜帶外來(lái)動(dòng)物疾病的風(fēng)險(xiǎn)非常重要。其次，飼料廠要注重生物安全。在不使用時(shí)蓋住接收坑，有效地控制害蟲(chóng)，防止灰塵收集系統(tǒng)中的灰塵再循環(huán)回到飼料中，并管理好整個(gè)工廠的人員移動(dòng)。后，養(yǎng)豬場(chǎng)和飼料廠要考慮監(jiān)測(cè)環(huán)境，以實(shí)現(xiàn)生物安全合規(guī)性。環(huán)境監(jiān)測(cè)在人類食品和寵物食品行業(yè)已經(jīng)成為常規(guī)舉措，可以幫助人們發(fā)現(xiàn)生物安全計(jì)劃中的薄弱環(huán)節(jié)。廣州勱博--冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。

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豬肉制品加工企業(yè)、生豬產(chǎn)品經(jīng)營(yíng)者采購(gòu)生豬產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)批批查驗(yàn)其動(dòng)物檢疫合格證明、肉品品質(zhì)檢驗(yàn)合格證明以及非洲病毒檢測(cè)結(jié)果（報(bào)告），確保購(gòu)進(jìn)的生豬產(chǎn)品不帶非洲病毒；采購(gòu)的進(jìn)口生豬產(chǎn)品應(yīng)附有合法的入境貨物檢驗(yàn)檢疫合格證明。不得采購(gòu)沒(méi)有非洲病毒檢測(cè)結(jié)果（報(bào)告）及未經(jīng)檢疫或者檢疫不合格的生豬產(chǎn)品，確保豬肉制品和經(jīng)營(yíng)的生豬產(chǎn)品不含非洲病毒。廣州勱博--養(yǎng)殖場(chǎng)PCRPCR檢測(cè)同熒光PCR類似，都是使用的引物和探針以VP72編碼區(qū)域作為靶基因設(shè)計(jì)，該基因研究清楚，且高度保守，即使在滅活或降解的樣品中也可檢測(cè)到已知所有22種p72病毒基因型的多個(gè)毒株。

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所謂real-time Q-PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。在real-time 技術(shù)的發(fā)展過(guò)程中，兩個(gè)重要的發(fā)現(xiàn)起著關(guān)鍵的作用：（1）在90年代早期，Taq DNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現(xiàn)，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測(cè)PCR產(chǎn)物成為可能。（2）此后熒光雙標(biāo)記探針的運(yùn)用使在一密閉的反應(yīng)管中能實(shí)時(shí)地監(jiān)測(cè)反應(yīng)全過(guò)程。離心后混合液體將分為下層的紅色酚氯i仿相，中間層以及無(wú)色水相上層。這兩個(gè)發(fā)現(xiàn)的結(jié)合以及相應(yīng)的儀器和試劑的商品化發(fā)展導(dǎo)致real-time Q-PCR方法在研究工作中的運(yùn)用。

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在real-time Q-PCR技術(shù)中，無(wú)論是相對(duì)定量還是標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的問(wèn)題有待解決。在標(biāo)準(zhǔn)曲線定量中，標(biāo)準(zhǔn)品的制備是一個(gè)必不可少的過(guò)程。目前由于無(wú)一統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室所用的生成標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品各不相同，致使實(shí)驗(yàn)結(jié)果缺乏可比性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)AppliedBiosystems公司推出，由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)。此外，用real-time Q-PCR來(lái)研究mRNA時(shí)，受到不同RNA樣本存在不同的逆轉(zhuǎn)錄（RT）效率的限制。在相對(duì)定量中，其前提是假設(shè)內(nèi)源控制物不受實(shí)驗(yàn)條件的影響的，合理地選擇合適的不受實(shí)驗(yàn)條件影響的內(nèi)源控制物也是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠與否的關(guān)鍵。

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與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比，Real-time Q-PCR的不足之處是：（1）由于運(yùn)用了封閉的檢測(cè)，減少了擴(kuò)增后電泳的檢測(cè)步驟，因此也就不能監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的大??；該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。（2）因?yàn)闊晒馑胤N類以及檢測(cè)光源的局限性，從而相對(duì)地限制了real-time Q-PCR的復(fù)合式（multiplex）檢測(cè)的應(yīng)用能力；（3）目前real-time Q-PCR實(shí)驗(yàn)成本比較高，從而也限制了其廣泛的應(yīng)用。

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傳統(tǒng)的PCR定量是應(yīng)用終點(diǎn)PCR來(lái)對(duì)樣品中的模板量進(jìn)行定量,通常用凝膠電泳分離,并用熒光染色來(lái)檢測(cè)PCR反應(yīng)的終擴(kuò)增產(chǎn)物。但在PCR反應(yīng)中,由于模板、試劑、焦磷酸鹽分子的聚集等因素影響聚合酶反應(yīng),終導(dǎo)致PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式進(jìn)行而進(jìn)入“平臺(tái)期”,而且一些反應(yīng)的終產(chǎn)物比另一些要多,因此終點(diǎn)PCR反應(yīng)方法定量并不準(zhǔn)確。研究表明，每個(gè)模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，起始拷貝數(shù)越多，Ct值越小。此外,終點(diǎn)PCR還容易交叉污染,產(chǎn)生假陽(yáng)性。

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核酸提取儀原理是，經(jīng)裂解液裂解后，細(xì)胞核中會(huì)釋放出核酸分子，會(huì)被吸附在磁珠表面，而蛋白質(zhì)等物質(zhì)不會(huì)被吸附，結(jié)合了核酸的磁珠被磁性物質(zhì)固定在管壁上轉(zhuǎn)移到洗脫管中，經(jīng)過(guò)反復(fù)洗脫，后我們可以得到純凈的DNA。根據(jù)其使用范圍可以分為兩類，一種是大型核酸提取儀，另一種是小型核酸提取儀；主要是利用磁珠純化核酸及蛋白質(zhì)從而達(dá)到提取核酸的目的，在細(xì)胞、動(dòng)植物組織等研究方面，一個(gè)樣品用一個(gè)探針，有效防止樣品之間的交叉污染。還有的在入舍消毒池中，只是例行把水和火堿放進(jìn)去，也不攪拌，火堿靠自身溶解需要較長(zhǎng)時(shí)間，那剛放好的消毒水的作用就不確實(shí)了。