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發(fā)布時(shí)間:2021-08-30 07:34  






熒光分光光度計(jì)種類(lèi)

熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡(jiǎn)便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn),可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無(wú)機(jī)化學(xué)等領(lǐng)域。熒光分光光度計(jì)的發(fā)展經(jīng)歷了手控式熒光分光光度計(jì),自動(dòng)記錄式熒光分光光度計(jì),計(jì)算機(jī)控制式熒光分光光度計(jì)三個(gè)階段;熒光分光光度計(jì)還可分為單光束式熒光分光光度計(jì)和雙光束式熒光分光光度計(jì)兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計(jì),配有壽命和相分辨測(cè)定的熒光分光光度計(jì)等。



熒光分光光度計(jì)是紫外嗎

熒光分光光度計(jì)不是紫外,這是兩個(gè)不同的概念。

紫外分光光度計(jì)檢測(cè)物質(zhì)環(huán)境的要求較低。其應(yīng)用波長(zhǎng)范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見(jiàn)光區(qū)。

熒光分光光度計(jì)檢測(cè)物質(zhì)要求環(huán)境高,微量檢測(cè),結(jié)果較準(zhǔn)確,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí),其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,對(duì)被測(cè)物質(zhì)要求高。相比較,熒光光度計(jì)較準(zhǔn)確。



淺析熒光光譜

無(wú)論分子初處于哪一個(gè)激發(fā)單重態(tài),通過(guò)內(nèi)轉(zhuǎn)換及振動(dòng)弛豫,均可返回到激發(fā)單重態(tài)的低振動(dòng)能級(jí),然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)的任一振動(dòng)能級(jí)上,這時(shí)發(fā)射的光稱(chēng)為熒光。由于振動(dòng)弛豫和內(nèi)轉(zhuǎn)換損失了部分能童,故熒光的波長(zhǎng)總比激發(fā)光波長(zhǎng)要長(zhǎng)。發(fā)射熒光的過(guò)程為 秒。由于電子返回基態(tài)時(shí)可以停留在基態(tài)的任一振動(dòng)能級(jí)上,因此得到的熒光譜線有時(shí)呈現(xiàn)幾個(gè)非??拷姆濉Mㄟ^(guò)進(jìn)一步振動(dòng)弛豫,這些電子都很快地回到基態(tài)的低振動(dòng)能級(jí)。




熒光光譜的壽命

熒光物質(zhì)具有兩個(gè)重要的發(fā)光參數(shù):熒光壽命和熒光產(chǎn)率。熒光壽命(τ)是指當(dāng)激發(fā)停止后,分子的熒光強(qiáng)度降到激發(fā)時(shí)強(qiáng)度的1/e所需的時(shí)間,它表示粒子在激發(fā)態(tài)存在的平均時(shí)間,通常稱(chēng)為激發(fā)態(tài)的熒光壽命。與穩(wěn)態(tài)熒光提供一個(gè)平均信號(hào)不同,熒光壽命提供的是激發(fā)態(tài)分子的信息,前者可以告訴你事情發(fā)生了,而后者可以告訴你為什么發(fā)生。




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