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單層細胞培養(yǎng)由于細胞在體外改變的環(huán)境下逐漸喪失了原有的性狀,往往和體內(nèi)情況不相符;動物實驗雖在體內(nèi)進行,但體內(nèi)多種因素制約以及體內(nèi)和外界環(huán)境相互影響而不能觀察到研究者為關(guān)心的中間過程。三維細胞培養(yǎng)技術(shù)模擬體內(nèi)的微環(huán)境,填補了單層細胞培養(yǎng)和動物實驗的鴻溝。該技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛運用,用人工脈管取代細胞外基質(zhì)生長支架,在完全可控制的生長條件下,能分化產(chǎn)生結(jié)構(gòu)完整的小管,在的發(fā)育生物學(xué)研究和組織工程領(lǐng)域作出了獨特1貢獻。
顛覆傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
顛覆傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
RCCS 是一種顛覆傳統(tǒng)的三度空間微重力培養(yǎng)系統(tǒng)。其利用培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱進行培養(yǎng),將培養(yǎng)液、細胞或組織一起加入培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱中,并去除所有氣泡。培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱安裝于具旋轉(zhuǎn)馬達之基座上,內(nèi)部組織、細胞或細胞團塊因旋轉(zhuǎn)切線力量及重力雙重影響下而保持懸浮狀態(tài)。隨著細胞或組織成長,旋轉(zhuǎn)速度可做調(diào)整,細胞形成團塊之后,必須提高轉(zhuǎn)速使其 不會沉降而碰觸底部。旋轉(zhuǎn)的目的是要讓所有細胞均勻交換養(yǎng)分和氣體,并且細胞和細胞之間可有足夠的接觸,有利于細胞聚集。另外,不論是培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱背側(cè)均具備硅膠制成的換氣膜以利進行1氣體交換,使細胞/ 組織得到充分氧氣及排除代謝后的廢氣。
細胞周期檢測技術(shù)
細胞周期指由細胞分裂結(jié)束到下一次細胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程,所需的時間叫細胞周期時間。
常用的方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法。
細胞凋亡檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL。
細胞轉(zhuǎn)移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗
其他實驗
細胞程度:軟瓊脂實驗
細胞屏障:跨膜電阻、熒光黃透過率
細胞粘附實驗
共培養(yǎng)實驗
裸鼠成瘤實驗