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環(huán)境條件
無菌環(huán)境:無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。細胞在活1體內(nèi),解1毒系統(tǒng)和免1疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的侵入,但細胞在體外培養(yǎng)的過程中,缺乏機體免1疫系統(tǒng)的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質(zhì)的解1毒能力。為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖,必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。
常見的微生物污染有支原體、細菌、真菌。支原體無致死毒性,可與細胞長期共存,對細胞有潛在影響,但體積小,不易鑒別,可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進行檢測。細菌增殖快,在短時間內(nèi)即可大量擴增,并產(chǎn)生毒1素殺1死細胞。真菌的種類繁多,肉眼可見,漂浮于培養(yǎng)液面上,可呈絲狀、管狀或樹枝狀等。
iPS研究方向
1.解析誘導體細胞重編程為IPS細胞的分子機制
2.研究 iPS細胞生物學特性和行為(如自我copy、增殖和分化等)調(diào)控的機制及IPS細胞體外定向誘導分化機制
3.提高iPS細胞制備效率
4.充分評價iPS細胞臨床應用的安全性
5.建立有效、安全、實用制備人iPS細胞的方法,即在闡明體細胞重編程為iPS細胞機制的基礎上建立無遺傳修飾的IPS細胞制備策略與方法(如僅利用一些小分子物質(zhì)即將人的細胞重編程為iPS細胞)
6.在前一項研究的基礎上,探索一條簡便制備“個體特異的”或“疾病特異的”治1療型人iPS細胞的技術(shù)路線和方法
細胞壁分類在細菌、真菌、植物的生物,其組成的細胞都具有細胞壁(Cell Wall),而原生生物則有一部分的生物體具有此構(gòu)造,但是動物沒有。
植物細胞壁主要成分是纖維素,經(jīng)過有系統(tǒng)的編織形成網(wǎng)狀的外壁。可分為中膠層、初生細胞壁、次生細胞壁。中膠層是植物細胞剛分裂完成的子細胞之間,先形成的間隔,主要成分是果膠質(zhì)(一種多糖類),隨后在中膠層兩側(cè)形成初生細胞壁,初生細胞壁主要由果膠質(zhì)、木質(zhì)素和少量的蛋白質(zhì)構(gòu)成。次生細胞壁主要由纖維素組成的纖維排列而成,如同一條一條的線以接近直角的方式排列,再以木質(zhì)素等多糖類黏接。
真菌細胞壁則是由幾丁質(zhì)、纖維素等多糖類組成,其中幾丁質(zhì)是含有碳水化合物和氨,性柔軟,有彈性,與鈣鹽混雜則硬化,形成節(jié)肢動物的外骨骼。幾丁質(zhì)不溶于水、酒精、弱酸和弱堿等液體,有保護功能。
細菌細胞壁組成以肽聚糖為主。
細胞膜細胞壁的內(nèi)側(cè)緊貼著一層極薄的膜,叫做細胞膜(Cell Membrane)。這層由蛋白質(zhì)分子和磷脂雙分子層組成的薄膜,水和氧氣等小分子物質(zhì)能夠自由通過,而某些離子和大分子物質(zhì)則不能自由通過。因此,它除了起著保護細胞內(nèi)部的作用以外,還具有控制物質(zhì)進出細胞的作用:既不讓有用物質(zhì)任意地滲出細胞,也不讓有害物質(zhì)輕易地進入細胞。此外,它能進行細胞間的信息交流。細胞膜在光學顯微鏡下不易分辨。用電子顯微鏡觀察,可以知道細胞膜主要由蛋白質(zhì)分子和脂類分子構(gòu)成。在細胞膜的中間,是磷脂雙分子層,這是細胞膜的基本骨架。在磷脂雙分子層的外側(cè)和內(nèi)側(cè),有許多球形的蛋白質(zhì)分子,它們以不同深度鑲嵌在磷脂分子層中,或者覆蓋在磷脂分子層的表面。這些磷脂分子和蛋白質(zhì)分子大都是可以流動的,可以說,細胞膜具有一定的流動性。細胞膜的這種結(jié)構(gòu)特點,對于它完成各種生理功能是非常重要的。