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浙江低溫生物菌種報價品牌企業(yè)“本信息長期有效”

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發(fā)布時間:2020-10-29 02:04  

低溫生物菌種的實驗器材

細菌、酵母菌,霉菌。肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基,滅菌脫脂牛乳,滅菌水,化學純的液體石蠟,甘油,河沙,瘦黃土或紅土、鹽,干冰,95%酒精,10%鹽酸,無水氯化鈣。滅菌吸管,滅菌滴管,滅菌培養(yǎng)皿,管形安瓿管,淚滴形安瓿管(長頸球形底),40目與 100目篩子,油紙,濾紙條(0.5×1.2cm),干燥器,真空泵,真空壓力表,噴燈,L形五通管,冰箱,低溫冰箱(-30℃),液氮冷凍保藏器。



低溫生物菌種的影響因素有哪些

菌的質(zhì)量:保藏的菌種應(yīng)培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的條件下,使之進入穩(wěn)定期,稍老一些的菌體對環(huán)境抵抗力強。另處,作為冷凍干燥的菌懸液細胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同,如果保存的菌液細胞濃度不高,就會使以后傳種造成困難,保存期也會受到影響。

保護劑:不同種類的保護劑對不同微生物的作用是不同的,如個別菌種在脫脂乳作保護劑的情況下失敗率高達99.99%,而采用葡聚糖等混和保護劑時失敗率大大減少。一般情況下,那些容易保存的菌種對保護劑的要求不很嚴格,而不易保存的菌種對保護劑的要求卻很苛刻。因此,選擇好的保護劑是冷凍干燥保存菌種的關(guān)鍵因素。

干燥速度:實驗表明,慢速干燥比快速干燥存活率高,如青霉菌6h干燥存活率為67.3%,而3h為59%。

空氣的影響:冷凍干燥后空氣對細菌細胞影響較大,可導致細胞損傷進而失敗,故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封,才有利于長期保存。

溫度的影響:在干燥和真空狀況下溫度的影響遠沒有上述幾項因素重要,因此可以在室溫下保存,但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響:水分含量過高對菌存活不利,完全脫水也不利于保存,一般把干燥后的細胞含水量控制在3%以下(1%-3%)



菌種保藏的目的、原理及常用的方法有哪些?

微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于不活躍或相對靜止的狀態(tài),才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。

低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據(jù)這三個因素而設(shè)計的。

保藏方法大致可分為以下幾種:

1.傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細菌用),培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。

2.液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種存活率,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。

3.載體保藏法

是將微生物吸附在適當?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當廣泛。

4.寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5.冷凍保藏法

可分低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

6.冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。



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