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發(fā)布時(shí)間:2021-07-27 06:09  







DNA提取過程中各種試劑的作用及原理

  溶液I—溶菌液:

  溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌體細(xì)胞壁的主要化學(xué)成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵,因而具有溶菌的作用。當(dāng)溶液中pH小于8時(shí),溶菌酶作用受到抑制。

  葡萄糖:增加溶液的粘度,維持滲透壓,防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。

  EDTA:

  (1)螯合Mg2 、Ca2 等金屬離子,抑制脫氧核糖核酸酶對(duì)DNA的降解作用(DNase作用時(shí)需要一定的金屬離子作輔基);

  (2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因?yàn)槿芫傅姆磻?yīng)要求有較低的離子強(qiáng)度的環(huán)境。



在整個(gè)核酸檢測(cè)的過程中,zui大的挑戰(zhàn)是什么?

不是實(shí)驗(yàn)室的負(fù)壓狀態(tài),也不是全副武1裝的超負(fù)荷工作,訪問中工作人員不約而同地提到了一個(gè)詞:準(zhǔn)確。新型冠狀病毒檢測(cè)受到患者病程發(fā)展以及樣本采集等諸多因素的影響,每一個(gè)樣本都是一道待解的難題,需要排除各種干擾,才能找到準(zhǔn)確結(jié)果。為了確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,只要檢測(cè)結(jié)果存疑,就必須再次復(fù)核,還可能要重新檢測(cè)。

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室主要檢測(cè)的是血液樣本。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室收到口岸送樣后,登記、編號(hào)、錄入信息,血常規(guī)檢測(cè)為自動(dòng)化操作,每個(gè)樣本檢測(cè)時(shí)間為1分鐘,可實(shí)時(shí)獲得口岸現(xiàn)場(chǎng)被采樣入境人員的白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù),作為新冠肺1炎的臨床表現(xiàn)判斷依據(jù)之一。衛(wèi)生檢疫綜合實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室多種檢測(cè)方法同時(shí)檢測(cè),綜合判斷,確保結(jié)果準(zhǔn)確性。



病毒核酸提取就像'針尖上跳舞'

檢驗(yàn)的首要一步是病毒核酸提取,這也是zui危險(xiǎn)的一步,需要在專門的生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行。檢測(cè)人員要在清潔區(qū)穿戴兩套防護(hù)服、兩副乳膠手套,戴護(hù)目鏡,穿靴套,前后穿過6道門,才能到達(dá)核心實(shí)驗(yàn)區(qū),病毒核酸提取就像是“針尖上的舞蹈”。“每次脫下防護(hù)服,衣服都濕透了。在2—4個(gè)小時(shí)的病毒核酸提取實(shí)驗(yàn)過程中,一般都會(huì)安排兩人一組進(jìn)行檢驗(yàn),既是規(guī)定要求,也是防止工作人員在密閉的負(fù)壓實(shí)驗(yàn)空間里出現(xiàn)意外。



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