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冷凍食品加工企業(yè)熒光定量PCR常用解決方案,廣州勱博公司

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發(fā)布時間:2020-12-01 08:05  






廣州勱博儀器有限公司產品服務包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真正的信號,它可用于定義樣本的域值循環(huán)數(Ct)。Ct值的含義是:每個反應管內的熒光信號達到設定的域值時所經歷的循環(huán)數。夏秋季節(jié)消毒沒什么問題,但到了冬天,他們仍然在舍外熏蒸消毒,這樣的效果是很差的。研究表明,每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數的對數存在線性關系,起始拷貝數越多,Ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線,因此只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數。

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擴增序列特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物,它又可分為直接法和間接法。間接的方法就是利用水解探針的策略。屠宰廠(場)生產設施設備和環(huán)境一旦被污染,病毒更易長期存活,更易在生豬和豬肉產品中循環(huán)擴增,成為病毒的“儲存器”“擴增器”。目前在real-time Q-PCR中廣泛使用的TaqMan系統就是運用了這個原理。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團,此時5′端熒光基團吸收能量后將能量轉移給臨近的3′端熒光淬滅基團(發(fā)生熒光共振能量轉移,FRET),因此探針完整時,檢測不到該探針5′端熒光基團發(fā)出的熒光。


廣州勱博儀器有限公司產品服務包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。廣州勱博--屠宰場核酸提取純化一般情況下,高溫消毒時,60℃就可以將多數病原殺滅,但汽i油噴燈溫度達幾百度,噴燈火焰一掃而過,也不會殺滅病原,因時間太短。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

廣州勱博--養(yǎng)殖場病毒核酸提取系統

核酸的提取和純化是法醫(yī)DNA物證檢驗的關鍵技術之一,目前實驗室i常用的方法包括核酸純化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系統,磁珠法由于操作簡便、快速,能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動化,因此成為目前法醫(yī)DNA實驗室核酸提取純化的主要手段。有人講過普通PCR后,通過電泳也可以進行定量,其實是將PCR產物的定量與PCR樣本中模板定量相混了。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過程中會造成核酸的斷裂和損失,因此在疑難檢材的檢驗過程中,存在PCR擴增失敗, DNA檢驗不成功的情況。

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對豬場實行非瘟檢測,并不是說要每天/每次都要進行檢測,而是基于豬場各區(qū)域/途徑的風險程度制定合適的檢測頻率,高風險區(qū)域檢測頻率相對而言要高些,如引種/車輛/精i液,建議每次采樣檢測,采購飼料/物資產品,建議先試用并隔離做檢測,其余定期監(jiān)測,檢測頻率可按每月或每周進行,具體可根據本場實際情況而定,可按照場內所劃分的管理單元格進行全i方位的篩選,從而降低疾病傳入風險。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出,由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點。


廣州勱博儀器有限公司產品服務包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。在real-timeQ-PCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的監(jiān)測和連續(xù)地分析擴增相關的熒光信號,隨著反應時間的進行,監(jiān)測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲線。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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隨著定量PCR儀設計上的不斷改進,對溫度控制的精密性越來越高,出現了像Rotor-Gene這樣的管間溫度均一性達±0.01℃的定量PCR儀,而該公司新近推出的Rotor-Gene6000更可達到±0.02℃的溫度分辨率。溫度上的高分辨率使得運用定量PCR儀進行高分辨率熔解曲線(HRM)分析基因型成為可能。在相對定量中,其前提是假設內源控制物不受實驗條件的影響的,合理地選擇合適的不受實驗條件影響的內源控制物也是實驗結果可靠與否的關鍵。高分辨率熔解曲線根據序列長度、GC含量和互補性分析樣品。不同的核酸序列,哪怕僅有一個堿基的差異,也會體現在熔解溫度的差別上。

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PCR是1985年開始出現的一項基因檢測技術,由于PCR技術具有簡便易行、靈敏度高等優(yōu)點,該技術被廣泛應用于基礎研究,成為分子生物學必不可少的研究工具。但在許多情況下,研究者們已不再滿足于得知某一特異DNA序列的存在與否,他們更著眼于對其進行精i確的核酸定量。②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內完成。因而,借助PCR對基因快速、敏感、特異而準確的定量成為目前分子生物學技術研究的熱點之一。實時熒光定量PCR( real-time quantitative PCR, RQ PCR)技術實現了PCR從定性到定量的飛躍,它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全封閉反應等優(yōu)點成為分子生物學研究中的重要工具。


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