分析性色譜的目的是定量或者定性測(cè)定混合物中各組分的性質(zhì)和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等,定量的分析性色譜有氣相色譜、液相色譜等。如果在2-3小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定或在15-20分鐘后仍無(wú)明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。色譜法應(yīng)用于分析領(lǐng)域使得分離和測(cè)定的過(guò)程合二為一,降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期,是比較主流的分析方法。在中華人民共和國(guó)藥典中,有超過(guò)約600種化學(xué)合成藥和超過(guò)約400種中藥的質(zhì)量控制應(yīng)用了液相色譜的方法。

透明流路管:指的是在過(guò)濾頭和輸送泵之間的那一段管路。這一個(gè)部分往往不是有點(diǎn)氣泡,而經(jīng)常是整個(gè)管中全是空氣而操作人員卻渾然不知,以致輸送泵工作了半天才發(fā)現(xiàn)流動(dòng)相瓶里的液體一點(diǎn)也沒(méi)少。這也是我們常說(shuō)的液相色譜儀至少一周要開(kāi)機(jī)一次的原因(我們做液相一定要有“微滲”的概論)。如果長(zhǎng)時(shí)間不用,這一段管路的液體會(huì)徹底干掉,而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細(xì)看是分辨不出來(lái)的。這種情況對(duì)于輸送泵很危險(xiǎn),因?yàn)楸脧脑O(shè)計(jì)來(lái)說(shuō)是輸送液體而不是輸送氣體,內(nèi)部的液體對(duì)于活塞來(lái)說(shuō)起到了機(jī)油的作用,如果活塞桿還殘存了一些緩沖鹽,則極易拉傷,造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。這種情況對(duì)于輸送泵很危險(xiǎn),因?yàn)楸脧脑O(shè)計(jì)來(lái)說(shuō)是輸送液體而不是輸送氣體,內(nèi)部的液體對(duì)于活塞來(lái)說(shuō)起到了機(jī)油的作用,如果活塞桿還殘存了一些緩沖鹽,則極易拉傷,造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。對(duì)于這種情況,要突出“預(yù)防為主”如:液相色譜使用人員要相對(duì)固定和穩(wěn)定,工作中合理搭源,每臺(tái)機(jī)一周至少一次實(shí)驗(yàn),如長(zhǎng)期不用起碼每周要沖流動(dòng)相2小時(shí)。養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣很重要。

液相色譜儀在使用過(guò)程中難免會(huì)接觸到腐蝕性的物質(zhì)。這些腐蝕性物質(zhì)不論是氣體、液體還是固體,都有可能損壞儀器的材料和零部件,降低色譜儀的使用壽命。在使用時(shí)要盡量避免這種情況的出現(xiàn)。 液相色譜儀流動(dòng)相類型有多種,流動(dòng)相性質(zhì)對(duì)樣品的分離影響很大。
液相色譜儀流動(dòng)相類型: 1、按組成可分:?jiǎn)谓M分流動(dòng)相和多組分流動(dòng)相。 2、按極性可分:極性流動(dòng)相、弱極性流動(dòng)相和非極性流動(dòng)相。 3、按作用可分:底劑和洗脫劑。液相工作者接觸多的是流動(dòng)相,流動(dòng)相也是造成液相色譜各種問(wèn)題的主要源頭。 4、按使用方式可分:等度流動(dòng)相和梯度流動(dòng)相。 5、按用途可分:己烷、乙1酸乙1酯、乙醇、乙1腈和水等。 采用二元或多元組合溶劑作為流動(dòng)相,可以靈活調(diào)節(jié)流動(dòng)相的極性和增加選擇性,改進(jìn)分離和調(diào)整出峰時(shí)間。
LC-100液相色譜系統(tǒng)分析前準(zhǔn)備: 1、流動(dòng)相前處理:將流動(dòng)相經(jīng)過(guò)0.45um的微孔濾膜過(guò)濾后,倒入流動(dòng)相瓶中,放入超聲波清洗器內(nèi)震蕩排氣20分鐘左右。 2、流動(dòng)相安裝:將處理好的流動(dòng)相放在儲(chǔ)液托盤上,將對(duì)應(yīng)通道的洗液管路分別放入流動(dòng)相瓶中,蓋好瓶蓋并記好對(duì)應(yīng)通道的流動(dòng)相種類?! ?、樣品記錄:將樣品處理稀釋后使用注射1器過(guò)濾頭過(guò)濾后裝入1.5ml樣品瓶中(大約三分之二),放入自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品架上,并記錄樣品瓶位置以便設(shè)置批處理文件。接通載氣當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后,通載氣,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。 4、色譜柱安裝:打開(kāi)柱溫箱門,將色譜柱的出口端安裝在色譜柱夾具上,在色譜柱上連接配管,在色譜柱出口端連接檢測(cè)器入口端的藍(lán)色PEEK管。 5、檢查清洗液:在RINSE通道內(nèi)放置50%甲1醇:水溶液;含有兩根管路的通道內(nèi)放置10%異丙1醇:水溶液。