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life 水凝膠中細(xì)胞的固定與標(biāo)記

使用小分子物質(zhì)，例如熒光標(biāo)記 phalloidin,核酸染料，活性和毒性檢測(cè)試劑，增值檢測(cè)試劑等小分子物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記方法，除了在孵育時(shí)間上適度延長(zhǎng)以便能在水凝膠中充分?jǐn)U散外，與傳統(tǒng)的 2D 細(xì)胞培養(yǎng)方式相同。整個(gè)支架是由尺寸均勻的聚合物纖維構(gòu)成，相鄰層面的纖維90o垂直排列，形成了三維的100%互連的多孔結(jié)構(gòu)。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白，則可直接用于觀測(cè)，因凝膠完全透明不影響觀測(cè)結(jié)果。如果使用抗l體等大分子對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記則不能直接在水凝膠中開(kāi)展，因水凝膠的孔徑原因，不適合直接抗l體標(biāo)記，需要使用 dextranase 將細(xì)胞從水凝膠中釋放出來(lái)，如果擔(dān)心細(xì)胞在操作過(guò)程中細(xì)胞生理活動(dòng)波動(dòng)，則可經(jīng)在凝膠中將細(xì)胞固定后在進(jìn)行操作。

如果按支持材料形成的方式分，基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為如下兩類(lèi)，一種是將細(xì)胞分散在液體水凝膠中，然后通過(guò)交聯(lián)實(shí)現(xiàn) 3D 培養(yǎng)，這類(lèi)產(chǎn)品代表生產(chǎn)商包括 Cellendes, Matrigel, Glycosan Biosystems 和 QGel 等；另外一種是將細(xì)胞「播種“在 3D 基質(zhì)上，這類(lèi)方法的代表廠商包括 3D Biotek, Alvetex 和 AlgiMatrix 等。與一般海綿狀多孔支架材料不同，該支架具有100%的開(kāi)放且相互連通的小孔，因此，細(xì)胞培養(yǎng)液可以容易地流通過(guò)支架空隙，從而消除了其他多孔支架經(jīng)常遇到的營(yíng)養(yǎng)/廢物交換不暢的問(wèn)題。第l一種方式中的 Cellendes 產(chǎn)品上面已經(jīng)做了簡(jiǎn)要介紹

1. 3D Insert-PS支架培養(yǎng)板

PS，即聚苯l乙烯(Poly Styrene），PS材料經(jīng)3D Biotek精密微細(xì)加工技術(shù)制作成標(biāo)準(zhǔn)孔徑的三維支架，然后再將3D Insert-PS支架放入培養(yǎng)板（6/12/24/48/96孔板）中，就是3D Insert-PS支架培養(yǎng)板

3D Insert-PS支架培養(yǎng)板更多產(chǎn)品信息，請(qǐng)見(jiàn)鏈接：3D Insert-PS（聚苯l乙烯3D培養(yǎng)支架培養(yǎng)板）

2.3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板

PCL，即聚己內(nèi)酯(Polycaprolactone），是一種可生物降解的生物材料，PCL材料經(jīng)3D Biotek精密微細(xì)加工技術(shù)制作成標(biāo)準(zhǔn)孔徑的三維支架，然后再將3D Insert-PCL支架放入培養(yǎng)板（6/12/24/48/96孔板）中，就是3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板

3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板更多產(chǎn)品信息，請(qǐng)見(jiàn)鏈接：3D Insert-PCL（聚已內(nèi)酯3D培養(yǎng)支架培養(yǎng)板）

3D Insert-PS支架培養(yǎng)板和3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板的共同點(diǎn)：

1.都是使用3D Biotek精密微細(xì)加工技術(shù)，保證孔道尺寸均一，且保證批次間一致性高；

2.可用于任何細(xì)胞的三維細(xì)胞培養(yǎng)，目前已成功培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型，

3D Insert-PCL/PS三維支架成功培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型；

3.都包含3D Insert 6孔培養(yǎng)板，12孔培養(yǎng)板，24孔培養(yǎng)板，48孔培養(yǎng)板和96孔培養(yǎng)板，供您選擇。

3D Insert-PS支架培養(yǎng)板和3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板的不同之處，以及該如何選擇哪：

1. 3D Insert-PS支架是透明的，因?yàn)榭捎玫怪蔑@微鏡實(shí)時(shí)觀測(cè)細(xì)胞的狀態(tài)；而3D Insert-PCL支架是不透明的，因此如果要觀測(cè)細(xì)胞的狀態(tài)，需做切片后觀測(cè)。