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等溫核酸試劑盒

據(jù)介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產(chǎn)物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監(jiān)控，甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內(nèi)。不過，經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產(chǎn)物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應(yīng)。

核酸試劑盒是如何工作的？

病毒的基因序列被設(shè)定為檢測靶點，通過對檢測樣本進行PCR擴增，因PCR反應(yīng)模板僅為DNA，因此在進行PCR反應(yīng)前，應(yīng)將新型冠狀病毒核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為DNA，使靶點的DNA序列指數(shù)級增加，每一個擴增出來的DNA序列都可以于預(yù)先加入的熒光標記探針結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號，擴增出來的靶點基因越多，累積的熒光信號就越強（就好比演唱會如果只有一個粉絲搖熒光棒很不顯眼，如果大家一起搖那就嗨了）。如果樣本中沒有該病毒，自然也就檢測不到熒光信號的增強了。

“一般來說，核酸檢測是目前準確的診斷方法?！庇腥烁嬖V記者，核酸檢測試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個方面有關(guān)。一是樣品沒有采集到。這一點很容易理解。例如，咽拭子采樣時人比較難受，深度不夠可能會采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。

另一個假陰性的原因是核酸檢測試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動，特別是定量的不造成檢測的不準確。換句話說，由于這一次各家核酸檢測試劑盒供應(yīng)商都是臨時啟動，有些準備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導(dǎo)致在生產(chǎn)過程中不進行定位，或是酶活性不足，或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等，都可能造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

數(shù)字PCR法和熒光PCR法的關(guān)鍵區(qū)別在于檢測結(jié)果的定量和相對定量差異。據(jù)了解，現(xiàn)階段數(shù)字PCR試劑和機器相價格加高（一臺儀器近百萬元），在SARS-CoV-2快速檢測中的優(yōu)勢并不大。

不過，由于具備自動化程度更好、耗時更短等技術(shù)優(yōu)勢，國內(nèi)多家掌握了數(shù)字PCR技術(shù)的核酸試劑研發(fā)企業(yè)正在嘗試開發(fā)適用于SARS-CoV-2檢測的相關(guān)試劑盒。