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廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。Florisil固相萃取柱規(guī)格

在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)化合物，所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下，很大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。

作用機(jī)理：在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間會(huì)產(chǎn)生極性作用力。普通吸附劑極性力作用在色譜中通常稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強(qiáng)，但比離子力更弱。常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團(tuán)，因此非極性基質(zhì)環(huán)境對(duì)吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明，在極性作用下，樣品的固相萃取過程中，基質(zhì)主要是非極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)化合物中多含有極性大的官能團(tuán)。

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含碳量

碳量是指填料的含碳量，從側(cè)面反映了C18的修飾程度，在分離效果和目標(biāo)成分保持時(shí)間方面起著重要作用。對(duì)于相同類型的填料，高碳柱上的非極性化合物比高碳柱上的碳含量高，碳鏈增大，同時(shí)也增加了結(jié)合相的非極性作用面積。C18碳含量由不同的鍵合工藝決定，市場(chǎng)上C18碳含量一般在17-22%之間，也有一些特殊C18碳含量超過22%，但低于14%的C18填料。大部分樣本可以用普通碳含量的C18來解決。而C18的含碳量也并非越多越好，根據(jù)樣品性質(zhì)和純化需要選擇不同含碳量的C18，例如，極性較大的化合物在高含碳量的C18中的保留程度不如低含碳量的C18。

在選擇C18反相分離柱時(shí)，應(yīng)根據(jù)樣品情況，改變流動(dòng)相的組成或溶劑強(qiáng)度，以提高分離度、選擇性或保留時(shí)間。

反相法C18在分離過程中，水可以與水-甲1醇、水-乙1腈、水-四氫呋1喃等多種有機(jī)溶1劑混合，而且分離效果也很好。適當(dāng)?shù)母牧紕?，如三?胺或乙1酸，可抑制硅膠表面殘余硅羥基的酸性，從而減少對(duì)酸或堿性組分的保留，并減少拖尾；同時(shí)，對(duì)流動(dòng)相 PH值的調(diào)節(jié)，可大大改變酸性或堿性組分的選擇性。對(duì)酸性組分，流動(dòng)相 PH<7時(shí)，增加色譜柱的保留時(shí)間；對(duì)堿性樣品，流動(dòng)相 PH≥7時(shí)，將堿性組分分為游離型(RNH2)，極性小，保留時(shí)間增大，可在固定相和流動(dòng)相之間多次分布，提高堿性組分的選擇性。

回收率

當(dāng)一個(gè)完整的 SPE操作過程中，目標(biāo)化合物可能會(huì)出現(xiàn)在出液、淋洗、洗脫液或吸附劑中，當(dāng)“目標(biāo)物不能回收或回收率低”現(xiàn)象出現(xiàn)時(shí)，則向樣品溶液中加入標(biāo)液，然后進(jìn)行一個(gè)完整的 SPE操作，分別收集出液、淋洗液和洗脫液并進(jìn)行分析。

先確定目標(biāo)化合物存在于哪個(gè)部分，然后確定問題來自以下哪個(gè)環(huán)節(jié)：目標(biāo)化合物不能保留在吸附劑中；沒有完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

目標(biāo)化合物在吸附劑中保留度不足

在樣品流出液或淋洗液中發(fā)現(xiàn)5%以上的目標(biāo)化合物時(shí)，可得出“不能保留目標(biāo)化合物在吸附劑中”的結(jié)論。

2.目標(biāo)化合物未完全洗脫

在樣本溶液流出液和淋洗液中沒有出現(xiàn)目標(biāo)化合物，而在洗脫液中只出現(xiàn)少量或不出現(xiàn)目標(biāo)化合物，則判斷為“目標(biāo)物未完全洗脫”

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通常用 mg/ml來表示固相萃取小柱的規(guī)格，其中 mg/ml表示填充物重量，填充物上一次可容納的zui大溶液體積。

淋洗容量通常是填充床容量的2-5倍。

吸收量：硅膠基質(zhì)填料可吸附的很大吸收量和干擾量，一般不超過填料重量的5%；

所能吸附的聚合物基質(zhì)填料zui大重量，一般不超過填料重量的10-15%。

所以在選擇固相萃取小柱規(guī)格時(shí)，首先要估計(jì)好被吸附物和干擾物的重量，然后去換算就知道應(yīng)該選擇什么規(guī)格更合適了！

例如， waters oasis HLB 30 cc/60 mg，這是一種高分子填充物，它可以吸附10-15%-60 mg的被測(cè)物質(zhì)和干擾物重量=6-9 mg。

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圓柱形容積

對(duì)同一種填料產(chǎn)品，在填料量一定的情況下，采用較小的柱管體積，流動(dòng)較慢。由于圓柱體體積越小，橫截面越小，填充高度越高，流動(dòng)相阻力就越大，從而使流速變慢。因此，在實(shí)際檢測(cè)工作中，如果對(duì)上樣量和上樣流速有要求，在不影響固相萃取效果的情況下，可選用大體積積柱管或大通量膜片裝置， CNW的 DISK盤片上樣速度可達(dá)50 ml/min，在處理大型水樣時(shí)具有明顯的流速優(yōu)勢(shì)。

溶液的選擇與使用

許多教師在實(shí)驗(yàn)過程中很容易忽略溶劑的選擇，如：C18小柱，一般用甲1醇活化，若用水活化，由于C18的疏水性，水的浸潤(rùn)速度會(huì)比甲1醇慢，導(dǎo)致流動(dòng)速度變慢。遇有此情況，調(diào)整活化溶劑即可解決。

1.在全球市場(chǎng)上，2018年全球色譜柱產(chǎn)量為3785.7千根，比2013年的3096.5千根有所增加，由美國主導(dǎo)，占全球色譜柱產(chǎn)量的45.90%。作為第二大區(qū)域市場(chǎng)的歐洲，占全球產(chǎn)量的24.23%?，F(xiàn)在主要的色譜柱生產(chǎn)商集中在安捷倫公司，沃特世公司，島津公司，世1界領(lǐng)1先的 ThermoFisher公司，它在2018年的市場(chǎng)占有率為22.01%，位居di一。

2.美國是色譜柱消費(fèi)zui多的地區(qū)，2018年1448.7千根色譜柱的消費(fèi)量占全球的38.27%，其次是歐洲的29.78%。

三、色譜柱可分為氣相色譜柱、液相色譜柱和 SPE固相萃取小柱，在全球范圍內(nèi)，液相色譜柱的產(chǎn)量占很大比例，2018年為2494千根，占65.88%。其中，氣相色譜柱的產(chǎn)量占24.74%, SPE固相萃取柱的產(chǎn)量占9.38%。

SPE檢測(cè)方法獨(dú)立于分析方法， SPE檢測(cè)方法僅供后續(xù)分析使用。二、為了使樣品溶液與填料充分接觸，溶劑流量不得過大。三、可以用自動(dòng)化儀器來完成。該儀器主要由柱架、柱塞泵、貯液槽、管道和處理樣品的處理機(jī)組成。預(yù)柱處理目的：1.去除可能存在于填料中的雜質(zhì)；2.使填料溶出，提高固相萃取的可再生性

建立 SPE方法1.為了防止分析物損失，樣品中的溶劑濃度不宜過高；2.采用反相萃取法，樣品用水或緩沖劑作溶劑，其中有機(jī)溶1劑含量不超過10%;3.為克服加樣過程中分析物損失的問題，可采用弱溶劑稀釋樣品，減少樣品體積，增加 SPE柱中的填料，并選擇對(duì)分析物保留較強(qiáng)的吸附劑等措施。