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交換
將試液加到交換柱上,用活塞控制一定的流速進(jìn)行交換。經(jīng)過一段時(shí)間之后,上層樹脂全部被交換、下層未被交換,中間則部分被交換,這一段稱為“交界層”。隨 著交換的進(jìn)行,交界層逐漸下移,至流出液中開始出現(xiàn)交換離子時(shí),稱為始漏點(diǎn)(亦稱泄漏點(diǎn)或突破點(diǎn)),此時(shí)交換柱上被交換離子的物質(zhì)的量數(shù)稱為始漏量。在到達(dá)始漏點(diǎn)時(shí),交界層的下端剛到達(dá)交換柱的底部,而交換層中尚有未被交換的樹脂存在,所以始漏量總是小于總交換量。
洗脫
當(dāng)交換完畢之后,一般用蒸餾水洗去殘存溶液,然后用適當(dāng)?shù)南疵撘哼M(jìn)行洗脫。在洗脫過程中、上層被交換的離子先被洗脫下來,經(jīng)過下層未被交換的樹脂時(shí),又可以再度被交換。因此洗脫液中被交換離子的濃度等于零,隨著洗脫的進(jìn)行,洗出液離子濃度逐漸增大,達(dá)到之后又逐漸減小,至完全洗脫之后,被洗出之離子濃度又等于零。
由于離子交換層析法分辨率高,工作容量大,并容易操作,因此它不但在、化工、食品等領(lǐng)域成
為獨(dú)立的操作單元,也已成為蛋白質(zhì)、多肽、核酸及大部分發(fā)酵產(chǎn)物分離純化的一種重要的方法。目前,在生化分離中約有75%的工藝采用離子交換層析法