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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序,作為參考:以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗,然后按相反的順序沖洗,所有的溶劑必須嚴(yán)格脫水??梢郧逑吹魵埩舻膹?qiáng)極性雜質(zhì),并對硅膠表面進(jìn)行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗,然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動(dòng)相不含緩沖液,就可以忽略一步用水沖洗??上慈埩舻姆菢O性雜質(zhì),多次在()沖洗時(shí)多次注射100-200μ l四氫,有助于去除強(qiáng)疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時(shí)候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽離子交換柱,用稀堿緩沖液沖洗,把交換性能很強(qiáng)的鹽去掉,再用水、、(除去固定相表面吸附的有機(jī)物)、、水,依次沖洗。
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保存色譜柱時(shí),柱中應(yīng)充滿或,柱連接處應(yīng)緊固,防止溶劑揮發(fā)干燥。請勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時(shí),如果壓力升高,有一種可能是燒結(jié)過的濾片被堵塞,此時(shí)應(yīng)更換濾片或取出清洗;還有一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),使柱頭受到污染;如果柱效降低或色譜峰變形,可能會(huì)出現(xiàn)柱頭塌陷,體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時(shí),小心將柱頭接頭擰開,用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中,用合適的溶劑潤濕固定相(與柱相同),壓平,然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高,但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端,在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米),可起到保護(hù)、延長柱壽命的作用。使用保護(hù)柱會(huì)失去一些柱效,這是值得的。
長壽隔板5183-4761預(yù)先打孔,壽命長,減少成核;自動(dòng)進(jìn)樣優(yōu)選隔板,適于整夜工作;進(jìn)樣溫度在400℃和350℃之間。5183-4759綠色墊片使用時(shí)間長,耐高溫;進(jìn)樣次數(shù)多;減少進(jìn)樣口粘貼;溫度達(dá)350度。上述三種隔墊均為隔墊,用等離子體處理,不粘隔墊。普通隔板:可連續(xù)使用200次,節(jié)能,節(jié)能。6.石墨墊片與螺母的選擇如何?先來看一看石墨墊的材料:石墨→材料柔軟,高溫度上限。vespel→由耐高溫的聚酰材料制成,材料在高溫下會(huì)產(chǎn)生損失。石墨墊片及螺母:短墊子,長墊子配長帽子。
例如, MS接口柱螺帽05988-20066應(yīng)該配預(yù)老化85% vespel,15%石墨墊子,通用柱帽可配85%vespel,15%石墨墊子,15%石墨墊子石墨墊片的選擇(應(yīng)該根據(jù)材料和色譜柱內(nèi)徑的大小),更換頻率一般都是更換色譜柱,泄漏后立即更換。7.襯管有什么作用?何時(shí)更換襯管?在選擇襯管時(shí)要考慮哪些因素?進(jìn)樣系統(tǒng)的核心部件是襯管,試樣蒸發(fā)后形成氣體。襯管的定期更換主要取決于:對比以前做過的譜圖、樣品的潔凈度、色譜峰是否有異?,F(xiàn)象:有鬼峰、峰形變化、重現(xiàn)性差、樣品高溫分解等。在選用襯管時(shí)要考慮的因素:進(jìn)樣口類型/進(jìn)樣技術(shù)、襯管體積、襯管處理或脫活、特殊性能(石英棉、石英杯、細(xì)錐等)。8.為什麼要使用去活化玻璃棉和襯管?不帶玻璃棉的內(nèi)襯是什么材料用來活的?進(jìn)樣口襯管上的活性點(diǎn)能吸附樣品成分,導(dǎo)致峰拖尾,損失靈敏度和重現(xiàn)性。在沒有分流進(jìn)樣和分析極性較小的化合物時(shí),應(yīng)推薦去活化襯管。
色譜柱如何沖洗?用于反相層析柱的沖洗:在下列溶劑中,每個(gè)色譜柱至少25 mL,清洗色譜柱無緩沖鹽的流動(dòng)相1000%腈 25%異100%正己烷*如果使用己烷-沖洗色譜柱,則必須先用異沖洗色譜柱,然后再使用反相流相!!!用于正相色譜柱的沖洗:以50 mL以上的溶劑沖洗色譜柱(分析柱)。50% 500%醋酸。
氣相色譜柱如何老化?裝上色譜柱后,先將色譜柱加熱至少3倍,再將載氣流速調(diào)至正常流速,并從100度升溫至老化溫度快速升至老化溫度。陳化溫度——在樣品分析終溫20度以上,但未超過色譜柱恒溫溫度上限的狀態(tài)下,通過恒溫2小時(shí)的方法快速老化,新的毛細(xì)管色譜柱迅速老化,當(dāng)色譜柱老化時(shí),升溫速度沒有限制,可以用升溫速率老化色譜柱。18.液相色譜儀的重要組成部分是什么?液體有什么檢測器?脫氣裝置,泵,溫度計(jì),自動(dòng)進(jìn)樣器,檢測器。探測器有:VWD可變波長檢測器、 DAD二極管陣列檢測器、 MWD多波長檢測器、 RID檢測器、示差檢測器、 FLD熒光檢測器。溶劑進(jìn)口過濾器如何選擇?傳統(tǒng)和毛細(xì)液相使用的溶劑過濾頭有:20μ m玻璃過濾頭(5041-2168)、 PTFE連接頭(5062-8517)、不銹鋼過濾頭(5062-8517)、不銹鋼過濾頭(01018-60025)配制液相用的溶劑過濾頭有:40μ m玻璃過濾頭(3150-0944)和 PTFE接頭頭7 mm/4 mm (G1361-23204)如果流動(dòng)相涉及下列溶劑,應(yīng)避免使用不銹鋼過濾頭:碘化鋰、、高濃度的及硫酸,有機(jī)酸溶液中的1%會(huì)腐蝕不銹鋼、和異或 THF混合液等。每天用35%的浸泡玻璃濾芯一小時(shí)(不用超聲波清洗,造成玻璃)。
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石英玻璃因其耐高溫、化學(xué)穩(wěn)定性好而被廣泛用作分析儀器反應(yīng)器,用于元素儀常規(guī)樣品測定中所用的氧化管、還原管、灰管等,基本上是石英玻璃制品。石英管的使用壽命,主要取決于它的材料質(zhì)量,其次正確的使用和保養(yǎng)也非常重要,下面就此提出一些建議:
1、石英反應(yīng)管碰撞易
在加載氧化劑、還原劑、清除失效催化劑時(shí),需要注意,在使用過程中,要注意不要與石英管碰撞(結(jié)塊的氧化銅)。內(nèi)封管塞,可涂一點(diǎn)高真空潤滑脂(涂多了碳空白會(huì)高),裝入時(shí)管塞與管口要垂直對正,緩慢旋轉(zhuǎn)插入,取出時(shí)也應(yīng)如此操作,否則易導(dǎo)致管塞崩口。當(dāng)反應(yīng)管裝入儀器時(shí),應(yīng)清除管內(nèi)所有的指印,避免結(jié)晶區(qū)的形成導(dǎo)致石英過早老化。
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2、石英反應(yīng)管與分析樣品發(fā)生反應(yīng)而引起的腐蝕
含有硼、硅、磷、氟、、硒等非金屬和含有鉀、鈉、鈣、鎂、鋅、鎘、銫、釔、銻、鉍等金屬的有機(jī)物在分析過程中,生成的氧化物、酸、堿、鹽、微塵類物質(zhì)會(huì)損害石英管,量小造成石英管的腐蝕,量大則直接導(dǎo)致石英管的,有許多還毒化管內(nèi)催化劑。所以在進(jìn)行此類物質(zhì)分析時(shí),應(yīng)將陶瓷或不銹鋼灰條替換為保護(hù)石英反應(yīng)管,并將相應(yīng)的氧化吸收劑覆蓋到反應(yīng)管或樣品上,防止其副反應(yīng)發(fā)生。若含氟樣品在反應(yīng)管中填充氧化鎂、銀鹽、紅鉛類催化劑,在含硅樣品上可覆蓋氧化鎢和氧化鉻或氧化銅粉末;含堿金屬、堿土金屬的樣品,可覆蓋、三氧化鎢等催化劑,還可以根據(jù)副反應(yīng)發(fā)生的類型和過程加入多種氧化劑的混合物。石英管中堿含量較高,建議更換不銹鋼反應(yīng)管。