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等溫核酸試劑盒
RNA試劑盒使用方法
使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價(jià)較高,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大,對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有必要購(gòu)買,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長(zhǎng)的問(wèn)題(如果碰上國(guó)內(nèi)無(wú)貨的時(shí)候,要從國(guó)外發(fā)貨,會(huì)等很長(zhǎng)一段時(shí)間)。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國(guó)產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯(cuò),還可以。
當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯(cuò),如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。
wistAmp??Liquid試劑盒提供經(jīng)甘油穩(wěn)定化處理的液態(tài)RPA試劑,該形態(tài)對(duì)于在實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行 PCR 和其他基于酶的反應(yīng)的任何人來(lái)說(shuō)都非常熟悉。這些試劑各自裝于單獨(dú)的試管中,用戶可隨意從中移取任何量的酶混合液來(lái)構(gòu)建自己所選的RPA反應(yīng)體積,配制用于多次反應(yīng)的預(yù)混液,或者以各種 RPA 組分比例進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以優(yōu)化試驗(yàn)。
除了具有室溫穩(wěn)定性的凍干態(tài)TwistAmp? RPA試劑盒這一旗艦產(chǎn)品,本次新推出的?TwistAmp? Liquid試劑盒是現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)開(kāi)發(fā)的理想之選。液體形態(tài)讓實(shí)驗(yàn)室更容易地在日常工作中使用快速簡(jiǎn)單的RPA法(該方法有時(shí)甚至采用與PCR相同的引物)取代 PCR法,以及更容易地開(kāi)發(fā)出定制的試驗(yàn)。
數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù),是一種核酸分子定量的檢測(cè)方法?,F(xiàn)階段,核酸分子的定量有三種方法:光度法基于核酸分子的吸光度來(lái)定量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR基于Ct值,即指可以檢測(cè)到熒光值對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR作為新定量技術(shù),主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,借助專門設(shè)備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬(wàn)個(gè)液滴分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,單一液滴為獨(dú)立反應(yīng)單元,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。