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固相萃取柱的操作方法介紹

一、反相萃取柱操作

從極性基體中提取非極性的樣品

1、活化:以3-5毫升去離子水(或緩沖液)淋洗萃取柱并保持萃取柱濕潤

2、上樣:以合適的流速使樣品均勻通過萃取柱

3、清洗:以5毫升適當極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱(常用的有純水,緩沖液,水/溶劑混合液)

4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升非極性溶劑分批洗脫至收集容器

二、正相萃取柱操作

從非極性基體中提取極性的樣品

1、活化:3-5毫升非極性溶劑淋洗萃取柱

2、清洗:以5毫升適當非極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱

3、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升極性溶劑分批洗脫至收集容器

三、離子交換萃取柱

提取帶電荷的樣品

1、活化:以3-5毫升去離子水/或低離子強度的緩沖液淋洗萃取柱

2、上樣:以較低的流速,使樣品均勻通過萃取柱

3、清洗:5毫升去離子水/或低離子強度的緩沖液淋洗萃取柱

4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升高離子強度的緩沖液洗脫至收集容器

固相萃取柱有哪些分類

SPE固相萃取的核心在于填料，即吸附劑。根據吸附劑的不同，固相萃取柱可大致分為以下三類：

1、正相固相萃取固定相（填料）：極性物質。分離對象：極性、中等極性、非極性流動相（洗脫劑）：非極性、中等極性吸附劑與化合物間作用力：氫鍵，π—π鍵等常用正相固相萃取柱：①極性官能團鍵合硅膠如-CN，-NH2；②極性吸附物質如Silica、Florisil、Alumina

2、反相固相萃取固定相：非極性分離對象：中等到非極性物質流動相：極性（水溶液）或中等極性吸附劑與化合物間作用力：范德華力或色散力常用反相固相萃取柱：十八烷基鍵合硅膠（C18柱）

3、離子交換固相萃取固定相：帶電荷物質分離對象：帶電荷的化合物（水溶液、有機溶液）流動相：去離子水、高或低離子強度溶液吸附劑與化合物間作用力：靜電吸引可分為兩種：①陰離子交換：脂肪族季銨類鹽鍵合硅膠，如SAX、NH2；②陽離子交換：磺酸基，如SCX，羧酸基團如WCX

固相萃取柱回收率低的原因及解決方法

固相萃取柱回收率低：

（1）可能原因：柱活化條件不恰當

解決方法：

根據固定相的不同，正確活化SPE小柱，反相填料，正相填料，離子交換填料：

（2）可能原因：樣品溶劑對目標成分的作用力比固定相強

選擇對目標成分具有更強選擇性的SPE小柱

調整樣品溶劑的pH值，增加目標成分在固定相上的作用力

改變樣品溶劑的極性，降低目標成分在溶劑中的作用力