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廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。硅膠固相萃取柱批發(fā)

反相模式下，溶劑體系的極性應(yīng)以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)物，所選擇的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應(yīng)能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。

正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動(dòng)相極性的分離模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團(tuán)極性相互作用；極性力比非極性力強(qiáng)，但比離子力弱；常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力，因?yàn)槿鯓O化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團(tuán)。結(jié)果表明： SPE正相萃取后，樣品基質(zhì)多為弱極性，如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)物多含有極性官能團(tuán)。

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渠道效應(yīng)

當(dāng) SPE小柱填料裝實(shí)后，流速過(guò)小柱時(shí)，液體是以層流通過(guò)填料層，將填料層充分浸潤(rùn)，潤(rùn)濕的液面截層向上推進(jìn)，見(jiàn)附圖；流速過(guò)大時(shí)，柱床厚度過(guò)大，可能在填料內(nèi)形成溝道，液流將穿過(guò)溝道，快速通過(guò)小柱，而使填料浸潤(rùn)不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減少，嚴(yán)重影響填料對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的保留性。

溶液環(huán)境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性，我們?yōu)槭裁匆P(guān)注該化合物的 pKa值，這些因素需要放在C18柱狀物上嗎？

A：首先， Ka指酸度系數(shù)，也稱為酸離解常數(shù)，可以被理解為酸離解H離子的能力，而 pKa=- lgKa，對(duì)于酸，在環(huán)境中 pH離子的平衡如下

廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。硅膠固相萃取柱批發(fā)

(在使用這些清潔溶劑之前，可與柱子供應(yīng)商協(xié)商，以確保它們不會(huì)對(duì)填料造成損害。硅樹(shù)脂基質(zhì)中的柱狀物一般都可以用，但是某些洗滌溶劑的配方可能導(dǎo)致有機(jī)聚合物基質(zhì)的填充物膨脹或收縮，從而影響其色譜特性。)此外，確保上表所用的清潔溶劑與以前使用的溶劑可互溶，丙i醇可作為良好的過(guò)渡。每一個(gè)溶劑系統(tǒng)至少要沖洗20個(gè)液柱體積。因?yàn)槟承┤軇┫到y(tǒng)粘度較大，應(yīng)相應(yīng)調(diào)整沖洗流速，以確保不超過(guò)泵的壓力。在用完胍或脲等溶劑清洗過(guò)的柱子上，至少要用40~50柱體積的 HPLC級(jí)純水進(jìn)行沖洗。對(duì)反相柱來(lái)說(shuō)，不推薦使用十二烷基磺酸鈉(SDS)和 Trition等表面活性劑，因?yàn)檫@些化合物一定會(huì)牢固地吸附到硅膠結(jié)合相柱上，因此難以去除。使用表面活性劑可以改變填料的表面性能。但是， SeparationGroup的研究表明：多肽合成過(guò)程中產(chǎn)生的保護(hù)基和清除劑對(duì)柱體的污染，可通過(guò)向流動(dòng)相中加入500μ L1% SDS溶液，以1 ml/min的速度清除。以5%~95% EBN/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脫后，在平衡起始條件下，柱體的多肽分離功能得以恢復(fù)。

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在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)化合物，所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間會(huì)產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強(qiáng)，但比離子力更弱。常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。

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凈化方式的 SPE常用于吸附雜質(zhì)，富集方式常用于吸附目標(biāo)物質(zhì)， GCB是一種石墨化碳黑，是在惰性氣氛下將炭黑加熱至2700-3000℃烘焙而成，它由六個(gè)碳原子組成平面六角形，層疊而成，對(duì)于芳香平面分子易于嵌入，且吸附能力強(qiáng)，對(duì)芳香化合物具有較強(qiáng)的選擇性。

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有一些項(xiàng)目，當(dāng)淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml洗脫，這個(gè)過(guò)程將洗脫和定容集進(jìn)行一步處理，前一步處理必然會(huì)影響洗脫步驟的定量結(jié)果。

就是溶劑互溶問(wèn)題，當(dāng)淋洗過(guò)程中使用的溶劑極性與洗脫溶劑的極性相差很大時(shí)，就會(huì)產(chǎn)化分層，洗脫阻力大，洗脫液有被稀釋的危險(xiǎn)等，從而導(dǎo)致洗脫效果不同，從而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果失敗。

我們需要知道廠家推薦的pH2-8耐受范圍，是為了保證色譜柱的正常使用壽命，硅膠鍵合相在耐受范圍之外使用，會(huì)導(dǎo)致鍵合相與硅膠基質(zhì)發(fā)生斷裂，從而破壞色譜柱的效率并保持其特性，但我們知道，超過(guò)耐受范圍 pH值范圍以外的溶劑對(duì)色譜柱的影響，主要是一個(gè)積累的過(guò)程，在溶劑的作用下，逐漸溶解，導(dǎo)致色譜柱的性能發(fā)生變化且不可逆，壽命縮短。

通用規(guī)格：100 mg/1毫升，200 mg/3毫升，500 mg/3毫升，1毫升/6毫升等。例如，在100 mg/mL中，100 mg/mL為填料質(zhì)量，1 mL為空柱管體積，也就是“總填料所占的體積”。

一次使用：為了避免交叉污染，保證檢測(cè)的可靠性， SPE柱一般一次使用。

固相萃取小柱主要作用及目的：用于樣品分離、提純、富集，減少基質(zhì)干擾，提高檢測(cè)靈敏度

消除基體干擾：固相萃取可有效去除干擾物質(zhì)，從而保證高靈敏度、高選擇性和 HPLC/MS穩(wěn)定可靠地聯(lián)用

減少離子抑制：在 HPLC/MS聯(lián)用分析中，固相萃取可有效去除引起離子抑制的主要物質(zhì)。消除這些干擾物可以提高質(zhì)譜的相關(guān)性，從而降低 zui的低定量極限。

目標(biāo)分析物濃縮：通常情況下，目標(biāo)化合物的濃度往往很低，以致于不能準(zhǔn)確地定量。固相萃取可以在不富集干擾物的情況下富集分析物。

改進(jìn)分析系統(tǒng)性能：固相萃取可以提高分析系統(tǒng)的性能，如：延長(zhǎng)分析色譜柱的使用壽命，減少系統(tǒng)停機(jī)和維護(hù)時(shí)間；降低離子抑制作用至零度，提高信號(hào)對(duì)應(yīng)性。